RESUMO
Los genes clonados de las proteínas de nucleocápside, N, de los arenavirus Junín y LCM (choriomeningitis linfocitaria) se insertaron en el vector de expresión pKG4 regulado por el promotor tardío del virus SV40. Cuando estas construcciones se utilizaron para transfectar las líneas celulares BHK-21 (fibroblastos de hamster lactante) y CV-1 (fibroblastos de riñón de mono verde africano) se observó la expresión transiente de un polipéptido de tamaño e inmunoreactividad indistinguible de la proteína N sintetizada durante una infección viral. El análisis por inmunofluorescencia reveló un patrón de distribución intracelular semejante al observado en células infectadas. Este patrón presentó variaciones desde una tinción citoplásmica difusa hasta gránulos citoplásmicos dispersos o concentrados en la zona perinuclear. La asociación de la proteína N con gránulos basófilos es semejante a la descripta en el efecto citópático causado por los arenavirus en las células infectadas, y podría relacionarse con las características fisicoquímicas de la proteina N, que contiene numerosas secuencias de aminoácidos básicos capaces de interactuar con ácidos ribonucleicos celulares (AU)
Assuntos
Animais , Cricetinae , Coriomeningite Linfocítica/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese , Transfecção , Proteínas do Core Viral/biossíntese , Arenavirus do Novo Mundo/genética , Capsídeo/biossíntese , Células Cultivadas , Chlorocebus aethiops , Efeito Citopatogênico Viral , Grânulos Citoplasmáticos/metabolismo , Grânulos Citoplasmáticos/ultraestrutura , Fibroblastos/metabolismo , Fibroblastos/ultraestrutura , Regulação Viral da Expressão Gênica , Vetores Genéticos , Mesocricetus , Vírus 40 dos SímiosRESUMO
Los genes clonados de las proteínas de nucleocápside, N, de los arenavirus Junín y LCM (choriomeningitis linfocitaria) se insertaron en el vector de expresión pKG4 regulado por el promotor tardío del virus SV40. Cuando estas construcciones se utilizaron para transfectar las líneas celulares BHK-21 (fibroblastos de hamster lactante) y CV-1 (fibroblastos de riñón de mono verde africano) se observó la expresión transiente de un polipéptido de tamaño e inmunoreactividad indistinguible de la proteína N sintetizada durante una infección viral. El análisis por inmunofluorescencia reveló un patrón de distribución intracelular semejante al observado en células infectadas. Este patrón presentó variaciones desde una tinción citoplásmica difusa hasta gránulos citoplásmicos dispersos o concentrados en la zona perinuclear. La asociación de la proteína N con gránulos basófilos es semejante a la descripta en el efecto citópático causado por los arenavirus en las células infectadas, y podría relacionarse con las características fisicoquímicas de la proteina N, que contiene numerosas secuencias de aminoácidos básicos capaces de interactuar con ácidos ribonucleicos celulares
